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| SB-EGR230S | 耐热RNase HII Thermostable RNase HII | 200 U | 圣尔生物share-bio | ¥580.00 |
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耐热RNase HII Thermostable RNase HII 介绍
| 产品详情 | 【产品简介】 本产品来源于极端耐热菌Pyrococcus abyssi(P.abyssi)，经重组表达纯化后获得。Thermostable RNaseHII是一种核酸内切酶，识别并切割RNA/DNA杂合链中的RNA链，不切割ssDNA、dsDNA，对单链RNA切割活性极低。Thermostable RNaseHII在单核糖核苷酸残基处从5'端进行切割，切割后产生一个5'端磷酸基团和一个3'端羟基。该Thermostable RNaseHII在60~80°C具有最佳活性，在37°C~95°C间均具有活性，在室温下活性低。本品极度耐热，95°C温育15 min后，几乎没有活性损失，可与PCR各反应体系兼容。 【活性定义】 一个单位（U）是指在60°C下，30 min切割100pmol含有单个核糖核苷酸的嵌合DNA/RNA杂交双链体底物所需的酶量。 【反应条件】 1×RHII Buffer；60°C温育。 【失活条件】 终浓度1 % SDS，95°C 15 min。 【应用范围】 1.RNase HII依赖性PCR(rhPCR)。 2.减少或去除PCR反应中的引物二聚体。 3.提高多重PCR产物的准确性。 4.区分异种同源基因。 5.SNP检测和稀有等位基因检测。 6.降解冈崎片段的RNA部分。 7.LAMP高灵敏度探针法检测。 8.与T7 EndoI一起使用时，在掺入的核糖核苷酸位点产生双链断裂。 【质量控制】 蛋白纯度：经SDS-PAGE凝胶电泳检测，蛋白纯度不低于95 % 。 非特异性内切酶活性：37°C下，在20 μl反应体系中将2UThermostable RNaseHII与200 ng超螺旋质粒DNA共同温育4h，使用琼脂糖凝胶电泳检测，少于20 % 的质粒DNA转变成缺刻或线性状态。 DNase活性：37°C下，在20 μl反应体系中将2U Thermostable RNaseHII与15 ng双链DNA片段共同温育16h，使用琼脂糖凝胶电泳检测，双链DNA片段无变化。 RNase活性：37°C下，在10 μl反应体系中将2U Thermostable RNaseHII与500 ng RNA共同温育1h，使用琼脂糖凝胶电泳检测，超过90 % 的RNA保持完整。 宿主DNA残留：采用中国药典2020版四部通则3407外源性DNA残留量测定法第三法定量PCR法，本品中大肠杆菌宿主细胞DNA残留量低于1拷贝/2U。 【使用方法】 1.以rhPCR流程为例： （1）以PCR Master Mix(2×)使用为例：
（2）轻柔吸打或轻弹管壁以混匀（切勿涡旋），然后瞬时离心以收集挂壁液滴； （3）设置PCR反应
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| 储存条件及期限 | 于-20℃保存 |
耐热RNase HII Thermostable RNase HII 说明书
For research use only. Not intended for human and animal therapeutic or diagnostic use.
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