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| SB-EGR227S | 热敏尿嘧啶DNA糖苷酶HL-Uracil DNA Glycosylase(UNG, UDG) | 500 U | 圣尔生物share-bio | ¥2800.00 |
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热敏尿嘧啶DNA糖苷酶HL-Uracil DNA Glycosylase(UNG, UDG) 介绍
| 产品详情 | 【产品简介】 HL-Uracil DNA Glycosylase(U ng,UDG)是冷水鱼来源重组热敏感的尿嘧啶-DNA糖基化酶（UDG），并经过多步纯化精制得到。与普通UDG相比，热敏UDG对温度更加敏感，室温下即可起作用，50°C以上即可失活。该酶能催化水解含有尿嘧啶的DNA链的尿嘧啶碱基并释放游离尿嘧啶，常被用于消除PCR、qPCR、RT-qPCR扩增引起的气溶胶污染。 【活性定义】 在25°C,30 min内降解1μg含有尿嘧啶的dsDNA所需要的酶量定义为1个活性单位（U）。 【酶活检测条件】 单链DNA酶活性：将1U HL-Uracil DNA Glycosylase(U ng,UDG)与1pmol单链寡核苷酸（FAM标记）在37°C孵育16h，经毛细管电泳检测，降解率<5 % 。 【失活条件】 50°C温育5 min。 【质量控制】 核酸内切酶活性：将1U HL-Uracil DNA Glycosylase(U ng,UDG)与200 ng超螺旋质粒DNA在37°C下，共同温育4h后，使用琼脂糖凝胶电泳检测，少于10 % 的质粒DNA转变成缺刻或线性状态。 非特异性核酸酶活性：将1U HL-Uracil DNA Glycosylase(U ng,UDG)与15 ng双链DNA片段在37°C温育16h，使用琼脂糖凝胶电泳检测双链DNA底物无变化。 RNase活性：将1U HL-Uracil DNA Glycosylase(U ng,UDG)总RNA在37°C温育1h，使用琼脂糖凝胶电泳检测超过90 % 的RNA仍保持完整。 宿主DNA残留：使用大肠杆菌16SrDNA特异性引物探针组，采用荧光定量PCR法检测1U HL-Uracil DNA Glycosylase(U ng,UDG)，大肠杆菌宿主基因组DNA残留低于10copies。 【使用方法】 1.按下列体系配制PCR反应液
a.根据实验需要，dUTP终浓度可在0.2~0.6mM之间调整。 b.根据实验需要，50 μl反应体系的使用量一般为0.1~1U。 2.反应程序
注:可根据实验需要调整PCR反应程序。 【注意事项】 HL-Uracil DNA Glycosylase(U ng,UDG)在大多数PCR或RT-PCR体系中均具有活性，但对于自行使用的PCR或RT-PCR体系，首次使用时建议先测试一下是否和所使用的体系兼容。 |
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| 储存条件及期限 | 于-20℃保存 |
热敏尿嘧啶DNA糖苷酶HL-Uracil DNA Glycosylase(UNG, UDG) 说明书
For research use only. Not intended for human and animal therapeutic or diagnostic use.
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