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SB-EGR223S | 核酸外切酶 I Exonuclease I | 1500 U | 圣尔生物share-bio | ¥210.00 |
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SB-EGR223S | 核酸外切酶 I Exonuclease I | 7500 U | 圣尔生物share-bio | ¥860.00 |
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核酸外切酶 I Exonuclease I 介绍
产品详情 | 【产品简介】 Exonuclease I(E.coli)是单链特异性核酸外切酶,沿3'-5'方向降解单链DNA,释放5'-脱氧核糖核苷酸。ExoI对单链有很强的特异性,不会降解双链DNA和RNA。此外,也无法降解由磷酰基团或乙酰基团封闭了3'-OH末端的DNA单链。本产品是把ExoI基因(E.coli)在大肠杆菌中进行重组表达后,经多次纯化分离而得到的。 【活性定义】 1活性单位(U)是指以单链DNA为底物,37°C、1×ExoI缓冲液条件下,30 min内释放10 nmol酸溶性核苷酸所需的酶量。 【反应条件】 37℃温育 15~30 min。 【失活条件】 80℃温育 20 min。 【应用范围】 1.从PCR产物中去除引物和寡核苷酸:ExoI可去除PCR反应中未用完的引物以及扩增产生的多余的单链DNA。 2.去除核酸混合物中的ssDNA:ExoI可特异性地消化反应液中的ssDNA,而不会消化dsDNA和RNA。 3.ssDNA检测:ExoI可用于检测存在游离3'羟基的ssDNA。 【质量控制】 蛋白纯度:经SDS-PAGE凝胶电泳检测,蛋白纯度不低于95 % 。 非特异性内切酶活性:37°C下,在20 μl反应体系中将100U Exonuclease I与200 ng超螺旋质粒DNA共同温育4h,使用琼脂糖凝胶电泳检测,少于20 % 的质粒DNA转变成缺刻或线性状态。 DNase活性:37°C下,在20 μl反应体系中将100U Exonuclease I与15 ng双链DNA片段共同温育16h,使用琼脂糖凝胶电泳检测,双链DNA片段无变化。 【使用方法】 应用1 PCR反应产物中去除引物或其他单链残留
注:配合虾碱性磷酸酶(SAP)用来去除残存的单核苷酸(dNTPs),之后不需要对PCR产物进行纯化,即可以进行测序反应。 反应条件:37℃温育 15~30 min。 失活条件:80℃温育 20 min。 应用2 单链DNA去除
DNA mixture中的单链DNA不超过1 μg 反应条件:37℃温育 15~30 min。 失活条件:80℃温育 20 min。 【注意事项】 1. Exo I 可兼容绝大多数PCR体系,可直接在PCR产物中添加。纯化后的PCR产物可直接用于测序,但不推荐直接用于克隆。 2. Exo I 用于单独去除ssDNA的实验,推荐搭配10×Exo I Buffer 使用。 3. Exo I 不能切割双链DNA,因此含有二级结构的单链DNA 需要 变性后才能完全消化。 4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套及口罩进行 实验操作。 |
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储存条件及期限 | 于-20℃保存 |
核酸外切酶 I Exonuclease I 说明书
For research use only. Not intended for human and animal therapeutic or diagnostic use.
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