-
蛋白&免疫印迹
蛋白制备 蛋白电泳制胶试剂盒 Tris-Glycine玻璃板预制胶 Tris-Hepes玻璃板预制胶 Bis-Tris塑料板预制胶 大分子蛋白电泳套装（醋酸预制胶） 小分子蛋白电泳套装（Tricine预制胶） 非变性蛋白电泳套装（ 非变性预制胶） 蛋白上样缓冲液 蛋白marker 电泳缓冲液&速溶颗粒 蛋白凝胶染色试剂蛋白转印 印迹孵育及检测 蛋白组学试剂蛋白提取试剂（蛋白组学） 蛋白酶（蛋白组学）蛋白电泳及转印仪器&零配件重组胰蛋白酶（质谱级） 重组赖氨酰内切酶（质谱级） IdeZ Protease（免疫球蛋白G降解酶） IdeS Protease（免疫球蛋白G降解酶） PNGase F（(N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F） Endo H（糖苷内切酶 H）相关耗材(蛋白组学)
- 抗体&抗原
- 免疫沉淀、免疫共沉淀试剂（IP、Co-IP）
- 免疫组化、免疫荧光
- ELISA 相关产品
- 分子生物学相关产品
- 细胞培养与检测
- 细胞资源库
- 外泌体试剂
- 小动物成像
- 生化试剂
- 常用实验器材
- 圣尔生物明星产品
- 新品推荐
- 圣尔周边
- 试用装
- 技术服务
| 产品编号 | 名称 | 包装 | 品牌 | 目录价 | 促销价 | 货期 | 数量 | 购物车 |
| SB-EGR219S | T4多聚核苷酸激酶 T4 Polynucleotide Kinase，T4 PNK | 500 U | 圣尔生物share-bio | ¥320.00 |
|
T4多聚核苷酸激酶 T4 Polynucleotide Kinase，T4 PNK 介绍
| 产品详情 | 【产品简介】 T4 Polynucleotide Kinase（简称T4 PNK），中文名称T4多聚核苷酸激酶，是一种多聚核苷酸5'-羟基激酶，能够催化ATP的γ-磷酸基团转移到寡核苷酸链（双链或单链DNA或者RNA）或3'-单磷酸核苷上的5'-羟基末端，且该反应过程可逆。此外，T4 PNK还具有3'磷酸酶活性，可以将3'-磷酸基团从寡核苷酸的3'磷酸末端、脱氧3'-单磷酸核苷和脱氧3'-二磷酸核苷上水解掉。 【活性定义】 1活性单位(U)定义为在1×T4 PNK Buffer中，37°C、30 min内使1nmol的[γ-32P]ATP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。 【应用范围】 1.对DNA或RNA5'末端进行磷酸化，以便进行连接反应。 2.DNA或RNA的末端标记，用作探针和进行DNA测序。 3.除去3'磷酸基团。 【质量控制】 蛋白纯度：经SDS-PAGE凝胶电泳检测，蛋白纯度不低于95 % 。 非特异性内切酶活性：37°C下，在20 μl反应体系中将10 U T4 Polynucleotide Kinase与200 ng超螺旋质粒DNA共同温育4 h，使用琼脂糖凝胶电泳检测，少于20 % 的质粒DNA转变成缺刻或线性状态。 DNase活性：37°C下，在20 μl反应体系中将10 U T4 Polynucleotide Kinase与15 ng双链DNA片段共同温育16 h，使用琼脂糖凝胶电泳检测，双链DNA片段无变化。 RNase活性：37°C下，在10 μl反应体系中将10 U T4 Polynucleotide Kinase与500 ng RNA共同温育1 h，使用琼脂糖凝胶电泳检测，超过90 % 的RNA保持完整。 宿主DNA残留：采用中国药典2020版四部通则3407外源性DNA残留量测定法第三法定量PCR法，本品中大肠杆菌宿主细胞DNA残留量低于1拷贝/10U。 【使用方法】 1.DNA 5'末端磷酸化：
10×T4 PNK Buffer不含ATP，需自行准备。 ①将上述体系充分混匀后，37°C温育30 min； ②反应完成后，75°C温育10 min使T4 Polynucleotide Kinase失活。 2.DNA 5'末端标记：
10×T4 PNK Buffer不含放射性标记的ATP，需自行准备。 ①将上述体系充分混匀后，37°C温育30 min； ②反应完成后，75°C温育10 min使T4 Polynucleotide Kinase失活 【注意事项】 1.金属离子螯合剂、磷酸盐、铵根离子、大于50 mM的KCl和NaCl均可显著抑制T4 Polynucleotide Kinase的活性。 2.聚乙二醇(PEG)和亚精胺可改善磷酸化反应的速率和效率。 3.提高ATP的浓度可让缺口磷酸化。切刻位点不能有效地磷酸化。CTP、GTP、TTP、UTP、dATP及dTTP均可以替代ATP作为磷酸供体。 4.T4 Polynucleotide Kinase使用时宜置于冰上，使用完毕后立即放置于-20°C保存。 |
||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 储存条件及期限 | 于-20℃保存 |
T4多聚核苷酸激酶 T4 Polynucleotide Kinase，T4 PNK 说明书
For research use only. Not intended for human and animal therapeutic or diagnostic use.
线上下单立享积分，加入圣尔会员，礼品随心兑！点击注册
