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SB-EGR218S | TEV 蛋白酶(切His tag)10 Units/μl TEV Protease | 0.1ml | 圣尔生物share-bio | ¥175.00 |
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SB-EGR218S | TEV 蛋白酶(切His tag)10 Units/μl TEV Protease | 1mL | 圣尔生物share-bio | ¥1200.00 |
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TEV 蛋白酶(切His tag)10 Units/μl TEV Protease 介绍
产品详情 | TEV 蛋白酶是一种高度特异性的半胱氨酸蛋白酶。催化效率最高的 TEV 蛋白酶识别序列是 ENLYFQ▼S;不过,P1'位置的氨基酸也可以是 G、A、M、C 或 H。它通常用于去除亲和纯化标签,如融合蛋白中的麦芽糖结合蛋白(MBP)、多聚组氨酸标签(His-Tag)或者其他亲和纯化标签。TEV 蛋白酶自身带有一个 6xHis 标记,便于从使用镍亲和树脂的反应中去除,而且本产品经过设计改造可提高热稳定性并减少自溶。建议把MBP、His或 GST等标签设计在融合蛋白的N端,并在亲和标签与目的蛋白之间设计加入TEV 蛋白酶专一性识别与酶切的上述序列。 推荐反应条件 1X TEV Protease Reaction Buffer, 30℃ 孵育 1 小时,或 4℃ 过夜孵育。 在实际操作过程中,为尽量保留目的蛋白的结构和生物活性,建议在4℃用TEV Protease酶切过夜。 优势和特性 1. TEV 蛋白酶分子量大小约28kDa,纯度:≥95%。10X Protease Reaction Buffer组成为:500mM Tris-HCl, 500mM NaCl, 5mM EDTA, 10mM DTT, pH 8.0。 2. TEV 蛋白酶突出的优点是在400mM咪唑中仍有较高活力,因此可直接将TEV 蛋白酶加入含高浓度咪唑的刚刚纯化的目的蛋白溶液中,在4℃边透析去除咪唑边进行酶切。 3. 本产品比较适用于酶切带His标签的蛋白,因为酶切后没有完全酶切的His标签重组蛋白、切除下来的His标签以及TEV 蛋白酶 (His-tag)都可以结合于镍柱而被除去,穿柱液中则含有所需的靶蛋白。 4. TEV 蛋白酶的活性不会被常见的丝氨酸蛋白酶抑制剂所抑制,如PMSF、AEBSF、bestatin、pepstatin和EDTA等。但如果融合蛋白样品中含有 > 2 M 尿素、> 0.5 M 盐酸胍、pH < 6 或 > 9, 或含有半胱氨酸蛋白酶抑制剂,则需要在 TEV 蛋白酶裂解前透析融合蛋白。 5. TEV 蛋白酶可高浓度使用,不会发生非特异性蛋白水解,反应可以线性放大,以适应更大的反应体积。 |
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储存条件及期限 | -20℃ |
TEV 蛋白酶(切His tag)10 Units/μl TEV Protease 说明书
For research use only. Not intended for human and animal therapeutic or diagnostic use.
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