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SB-EGR555S | 快速内切酶Cfr42I-HF(同裂酶SacII,KspI,Sfr303I,SgrBI) | 60μl | 圣尔生物share-bio | ¥192.00 |
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快速内切酶Cfr42I-HF(同裂酶SacII,KspI,Sfr303I,SgrBI) 介绍
产品详情 | 快速内切酶Cfr42I 【产品介绍】 圣尔快速内切酶是一系列经过基因工程重组的快速限制性内切酶,适用于质粒DNA、PCR产物或基因组DNA等的快速酶切。所有快速内切酶在圣尔通用酶切Buffer或Color Buffer中都具有优良的活性,能够在5-15分钟内完成酶切。此外,圣尔生物去磷酸化、连接试剂在圣尔通用酶切Buffer中均具有100%活性,支持一管化反应,提升“酶切-修饰-连接”的体验。 Color Buffer包括红色和黄色示踪染料,可将产物直接用于凝胶电泳。Color Buffer的红色染料与2500 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近;黄色染料与10 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近。 【识别序列】 CCGC/GG 【酶切位点】 5'...C C G C ↓ G G...3' 3'...G G ↑ C G C C...5' 【保护碱基】 Not Determined 【同裂酶】 SacII,KspI,Sfr303I,SgrBI 【反应温度】 37°C 【随酶Buffer】 10×圣尔通用酶切Buffer;10×圣尔Color Buffer 【失活条件】 80°C, 20 min 【甲基化敏感性】 Dam: no effect.;Dcm: no effect.;CpG: blocked.;EcoKI: no effect.;EcoBI: no effect. 【使用方法】 1 DNA快速酶切流程 1.1 在冰上按如下建议的加样顺序配制反应体系:
注:本体系适用于经过纯化的PCR产物酶切。未纯化的PCR产物具备一定的离子强度,10×圣尔通用酶切Buffer(或10×圣尔Color Buffer)加入量可适当减少至2μl。但由于PCR体系中,DNA聚合酶很可能同时具有外切酶活性,会影响酶切产物,因此如下一步需进行克隆等操作,建议酶切前对PCR产物进行纯化。 1.2 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴; 1.3 37°C温育15 min(质粒),或15-30 min(PCR产物),或30-60 min(基因组DNA); 1.4 80℃温育20 min即可使酶失活,停止反应(可选); 1.5 如果使用圣尔Color Buffer进行酶切反应,得到的产物可以直接进行上样电泳。 2 双酶切或多酶切 2.1 每种快速内切酶的用量为1 μl,并根据需要适当扩大反应体系; 2.2 所有快速内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10; 2.3 如果所用的几种快速内切酶的最适反应温度不同,应先以最适温度低的酶开始酶切,再添加最适温度较高的酶,在其最适反应温度下进行酶切反应。 3 适用于质粒的扩大反应体系
注:如果总反应体系大于20 μL,应适当增加温育时间,尽量使用水浴、金属浴或沙浴。 【缓冲液兼容性】
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储存条件及期限 | -20°C储存,4度蓝冰运输 |
快速内切酶Cfr42I-HF(同裂酶SacII,KspI,Sfr303I,SgrBI) 说明书
For research use only. Not intended for human and animal therapeutic or diagnostic use.
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