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SB-EGR553S | 内切酶BsrDI(同裂酶:Bse3DI, BseMI) | 25μl | 圣尔生物share-bio | ¥192.00 |
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内切酶BsrDI(同裂酶:Bse3DI, BseMI) 介绍
产品详情 | 内切酶BsrDI 【产品介绍】 BsrDI来源于Bacillus stearothermophilus D70,由大小两个亚基组成,属于异二聚体酶。BsrDI识别特定序列GCAATG/CATTGC,切割顶链时在识别位点下游2个核苷酸处,底链则在识别位点后直接切割,产生特定的黏性末端,属于TypeIIS型限制酶,可用于Golden gate组装。 【识别序列】 GCAATG (2/0) 【酶切位点】 5'...G C A A T G N N ↓...3' 3'...C G T T A C↑N N ...5' 【保护碱基】 Not Determined 【同裂酶】 Bse3DI, BseMI 【反应温度】 37°C 【随酶Buffer】 10×Buffer B 【失活条件】 80°C, 20 min 【甲基化敏感性】 Dam: no effect.;Dcm: no effect.;CpG: no effect.;EcoKI: no effect.;EcoBI: some blocked. 【超长时间温育检测】 最适反应温度下,将10 U BsrDI与1 μg λDNA共同温育3 h,未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解,延时酶切可能出现星号活性。 【使用方法】 1 DNA酶切流程 1.1 在冰上按如下建议的加样顺序配制反应体系:
注:DNA底物中应不含苯酚、氯仿、乙醇、EDTA、洗涤剂或高浓度盐,否则将会影响酶活性 1.2 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴; 1.3 37°C温育15-60 min; 1.4 80°C温育20 min即可使酶失活,停止反应(可选); 【注意事项】 1 反应体系中加入的酶体积不应超过总体积的10%,避免酶中过多的甘油引起星号活性; 2 限制性内切酶存储缓冲液中的添加剂(例如甘油、盐)与底物溶液中的污染物(例如盐、EDTA或乙醇等)相同,反应体积越小,酶切反应抑制效应越强。 3 BsrDI可在10×圣尔通用酶切Buffer中使用,但星号活性明显强于在Buffer B中反应。若要使用圣尔通用酶切Buffer进行反应,不建议酶切时间超过3 h或者超过2 U的BsrDI/µg DNA底物。 【缓冲液兼容性】
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储存条件 | -20°C储存,4度蓝冰运输 |
内切酶BsrDI(同裂酶:Bse3DI, BseMI) 说明书
For research use only. Not intended for human and animal therapeutic or diagnostic use.