内切酶BsrDI(同裂酶:Bse3DI, BseMI)

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货      号 SB-EGR553S
规      格 25μl
品      牌 圣尔生物share-bio
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SB-EGR553S 内切酶BsrDI(同裂酶:Bse3DI, BseMI) 25μl 圣尔生物share-bio ¥192.00

内切酶BsrDI(同裂酶:Bse3DI, BseMI) 介绍

产品详情

内切酶BsrDI

产品介绍

BsrDI来源于Bacillus stearothermophilus D70,由大小两个亚基组成,属于异二聚体酶。BsrDI识别特定序列GCAATG/CATTGC,切割顶链时在识别位点下游2个核苷酸处,底链则在识别位点后直接切割,产生特定的黏性末端,属于TypeIIS型限制酶,可用于Golden gate组装。

识别序列

GCAATG (2/0)

酶切位点

5'...G C A A T G N N ...3'

3'...C G T T A CN N ...5'

【保护碱基】

Not Determined

同裂酶

Bse3DI, BseMI

反应温度

37°C

随酶Buffer

10×Buffer B

【失活条件】

80°C, 20 min

甲基化敏感性

Dam: no effect.Dcm: no effect.CpG: no effect.EcoKI: no effect.EcoBI: some blocked.

超长时间温育检测

最适反应温度下,将10 U BsrDI1 μg λDNA共同温育3 h,未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解,延时酶切可能出现星号活性。

使用方法

1 DNA酶切流程

1.1 在冰上按如下建议的加样顺序配制反应体系:

 

50 μl体系

ddH2O

up to 50 μL

10×Buffer B

5 μL

底物DNA

1 μg

内切酶BsrDI (10 U/μl)

1 μL

注:DNA底物中应不含苯酚、氯仿、乙醇、EDTA、洗涤剂或高浓度盐,否则将会影响酶活性

1.2 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴;

1.3 37°C温育15-60 min

1.4 80°C温育20 min即可使酶失活,停止反应(可选);

【注意事项】

1 反应体系中加入的酶体积不应超过总体积的10%,避免酶中过多的甘油引起星号活性;

2 限制性内切酶存储缓冲液中的添加剂(例如甘油、盐)与底物溶液中的污染物(例如盐、EDTA或乙醇等)相同,反应体积越小,酶切反应抑制效应越强。

3 BsrDI可在10×圣尔通用酶切Buffer中使用,但星号活性明显强于在Buffer B中反应。若要使用圣尔通用酶切Buffer进行反应,不建议酶切时间超过3 h或者超过2 UBsrDI/µg DNA底物。

【缓冲液兼容性

 

圣尔通用酶切Buffer

FastDigest Buffer

(Thermo Scientific)

rCutSmart™ Buffer

(NEB)

QuickCut™ Buffer

(Takara)

活性

50%

100%

50%

100%

 

储存条件 -20°C储存,4度蓝冰运输
搜索质检报告(COA)
搜索MSDS
暂无技术资料

内切酶BsrDI(同裂酶:Bse3DI, BseMI) 说明书

For research use only. Not intended for human and animal therapeutic or diagnostic use.

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