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| SB-EGR436S | 快速内切酶EcoRI-HF(同裂酶FunII) | 600 rxns | 圣尔生物share-bio | ¥192.00 |
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快速内切酶EcoRI-HF(同裂酶FunII) 介绍
| 产品详情 | 快速内切酶EcoRI 【产品介绍】 圣尔快速内切酶是一系列经过基因工程重组的快速限制性内切酶，适用于质粒DNA、PCR产物或基因组DNA等的快速酶切。所有快速内切酶在圣尔通用酶切Buffer或Color Buffer中都具有优良的活性，能够在5-15分钟内完成酶切。此外，圣尔生物去磷酸化、连接试剂在圣尔通用酶切Buffer中均具有100%活性，支持一管化反应，提升“酶切-修饰-连接”的体验。 Color Buffer包括红色和黄色示踪染料，可将产物直接用于凝胶电泳。Color Buffer的红色染料与2500 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近；黄色染料与10 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近。 【识别序列】 G/AATTC 【酶切位点】 5'...G ↓ A A T T C...3' 3'...C T T A A ↑ G...5' 【保护碱基】 5 【同裂酶】 FunII 【反应温度】 37°C 【随酶Buffer】 10×圣尔通用酶切Buffer；10×圣尔Color Buffer 【失活条件】 80°C, 20 min 【甲基化敏感性】 Dam: no effect.；Dcm: no effect.；CpG: impaired.；EcoKI: no effect.；EcoBI: impaired. 【使用方法】 1 DNA快速酶切流程 1.1 在冰上按如下建议的加样顺序配制反应体系：
注：本体系适用于经过纯化的PCR产物酶切。未纯化的PCR产物具备一定的离子强度，10×圣尔通用酶切Buffer（或10×圣尔Color Buffer）加入量可适当减少至2μl。但由于PCR体系中，DNA聚合酶很可能同时具有外切酶活性，会影响酶切产物，因此如下一步需进行克隆等操作，建议酶切前对PCR产物进行纯化。 1.2 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀（切勿涡旋），然后瞬时离心以收集挂壁液滴； 1.3 37°C温育15 min（质粒），或15-30 min（PCR产物），或30-60 min（基因组DNA）； 1.4 80℃温育20 min即可使酶失活，停止反应（可选）； 1.5 如果使用圣尔Color Buffer进行酶切反应，得到的产物可以直接进行上样电泳。 2 双酶切或多酶切 2.1 每种快速内切酶的用量为1 μl，并根据需要适当扩大反应体系； 2.2 所有快速内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10； 2.3 如果所用的几种快速内切酶的最适反应温度不同，应先以最适温度低的酶开始酶切，再添加最适温度较高的酶，在其最适反应温度下进行酶切反应。 3 适用于质粒的扩大反应体系
注：如果总反应体系大于20 μL，应适当增加温育时间，尽量使用水浴、金属浴或沙浴。 【缓冲液兼容性】
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| 储存条件 | -20℃ |
快速内切酶EcoRI-HF(同裂酶FunII) 说明书
For research use only. Not intended for human and animal therapeutic or diagnostic use.
