| 产品编号 | 名称 | 包装 | 品牌 | 目录价 | 促销价 | 货期 | 数量 | 购物车 |
| SB-C0320 | MW25000线性PEI转染试剂 Polyethylenimine Linear(PEI) | 1g | 圣尔生物share-bio | ¥2800.00 |
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| SB-C0320 | MW25000线性PEI转染试剂 Polyethylenimine Linear(PEI) | 5×1g | 圣尔生物share-bio | ¥12800.00 |
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MW25000线性PEI转染试剂 Polyethylenimine Linear(PEI) 介绍
| 产品详情 | 【产品概述】 线性化聚乙烯亚胺（Polyethylenimine Linear，PEI）25000转染试剂是一种高电荷阳离子聚合物，非常容易结合带负电荷的核酸分子，形成复合物，并使该复合物进入细胞中。该转染试剂是一种瞬时转染试剂，细胞毒性低，转染效率高，，在HEK293、HEK293T和CHO等细胞中转染效率较高。多用于包装慢病毒、AAV病毒、逆转录病毒。也可以转染A549和Hela细胞等，但转染效率略低。该试剂与含血清的培养基兼容，能高效的将核酸导入细胞。
【溶解性】 溶于：热水，低pH的冷水，甲醇和乙醇。不溶于：苯，乙醚和丙酮 【操作步骤】 1）配置好的PEI溶液从-20℃拿出融化后，可放在4℃冰箱保存，绝不可重新冻存。 2）对大多数细胞来而言，每1μg DNA使用3μL PEI转染试剂都能获得较高转染效率。也可尝试每1μg DNA使用1.5~4 μL体积线性PEI转染试剂进行优化。 3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套及通风橱操作。 【储液配置】 1.材料 PEI 25000、超纯水、12 mol/L盐酸（HCl）、10 mol/L氢氧化钠（NaOH）、一次性0.1~0.2 μm PES真空无菌过滤器、无菌HDPE或聚丙烯储存瓶。 2.配置储存液（1 mg/mL） 1）于1 L玻璃烧杯，将1g PEI 25000粉末加入900 mL 超纯水中，在磁子搅拌器上搅拌均匀，产生小涡。 2）边搅拌边滴加入盐酸（12 mol/L）调节pH，直至pH＜2.0。 3）盖上烧杯顶部并搅拌3小时至完全溶解；整个过程要保持pH＜2.0。 【注】：可能会存在一些小纤维状颗粒不能溶解，这是正常现象。 4）边搅拌边滴加入NaOH（10 mol/L）调节pH，直至到6.9 ~7.1。 5）将溶液转入量筒内，并加水定容到1L。 6）用一次性0.1~0.2 µm PES真空过滤器过滤除菌，即得到1 mg/mL的储存液。 7）根据需要分装并储存在-20 °C，1年稳定。 【注】：储存液再次融化后，可置于4 °C保存，2周稳定，但绝不可重新冻存 【转染操作流程】 以6孔板为例： 1.接种细胞：为了提高转染效率，建议在转染前一天接种细胞，以转染时细胞密度在70%~80%为宜。 2.准备DNA-PEI复合物：按照以下体系配制DNA-PEI核酸-转染试剂复合物： 1）对于每孔细胞，使用100μL无血清培养基稀释2μg目的DNA，充分混匀成 DNA稀释液。 【注】：无血清稀释液建议采用Opti-MEM或ddH2O 2）立刻向100μL的DNA稀释液中加入5μL的PEI 25000转染试剂，旋涡10秒，充分混匀。 3）在室温下孵育10~25min，使得形成DNA-PEI阳离子核酸转染试剂复合物。 3.转染细胞： 1）在形成复合物过程中，移除细胞生长培养基，每孔中加入2 mL新鲜预热的完全培养基。 2）直接将100μL DNA-PEI核酸-PEI复合物加入细胞中，摇动培养板，轻轻混匀。 3）37℃，5% CO2培养箱培养，转染后最快7h即可检测到转入基因的表达。请自行确定适合检测时间。 4.稳转筛选（可选） 转染24h后，将细胞传代至新鲜的生长培养基中（将细胞稀释10倍以上），37℃，5% CO2培养箱孵育过夜。第二天加入与转染抗性基因相匹配的筛选药物。约1~2周可筛选到耐药性克隆，在这期间需经常更换含筛选药物的生长培养基。 【参考用量】
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| 储存条件及期限 | 运输方式：室温运输。 保存方式：粉末在室温或4℃保存，有效期2年。储存液-20℃保存，有效期1年；4℃保存，有效期2周。不可重新冻存。 |
MW25000线性PEI转染试剂 Polyethylenimine Linear(PEI) 说明书
For research use only. Not intended for human and animal therapeutic or diagnostic use.
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