DNA提取试剂盒的种类
根据提取原理和样本来源，DNA提取试剂盒主要分为以下几类：
按提取原理分类
- 柱式离心法 - 利用硅胶膜吸附柱在高盐条件下特异性吸附DNA，通过离心洗涤去除杂质，最后用低盐缓冲液洗脱DNA
- 磁珠法 - 通过磁珠表面基团在高盐条件下吸附DNA，利用磁场分离，洗涤后洗脱DNA（适合高通量自动化操作）
- 溶液法/酚-氯仿法 - 传统方法，利用有机溶剂分离DNA与蛋白质（毒性较大，现较少使用）
按样本来源分类
- 基因组DNA提取试剂盒 - 适用于细胞、组织、血液、植物、细菌等不同来源的基因组DNA提取
- 质粒DNA提取试剂盒 - 专门用于从细菌中提取环状质粒DNA
- 特殊样本DNA提取试剂盒 - 针对石蜡包埋组织、土壤环境样本、游离DNA等特殊样本的提取
按提取规模分类
- 微量/小量提取 - 处理少量样本，得到几μg DNA，用于常规鉴定
- 中量提取 - 处理中等量样本，得到几十μg DNA
- 大量提取 - 处理大量样本，得到几百μg至mg级DNA
DNA提取试剂盒对比
| 产品名称 | 货号 | 类别 | 兼容样本 | 产品特点 | 主要应用 |
|---|---|---|---|---|---|
| 高纯度质粒小量提取试剂盒 | SB-NG201 | 质粒DNA | 细菌培养物（1.5-4.5ml） |
|
酶切、转化、PCR、体外转录、测序 |
| 高纯度质粒小提中量试剂盒 | SB-211 | 质粒DNA | 细菌培养物（5-15ml） |
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酶切、转化、PCR、体外转录、测序 |
| 高纯度质粒大提试剂盒 | SB-NG221 | 质粒DNA | 细菌培养物（100-500ml） |
|
酶切、PCR、测序、连接、转化 |
| 无内毒素质粒小提中量试剂盒 | SB-213 | 质粒DNA 无内毒素 |
细菌培养物（5-15ml） |
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酶切、转化、PCR、体外转录、测序、转染 |
| 无内毒素质粒大提试剂盒（转染级） | SB-NG223 | 质粒DNA 无内毒素 |
细菌培养物（150-200ml） |
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酶切、转化、PCR、体外转录、测序、转染 |
| 增强型无内毒素质粒大量提取试剂盒 | SB-EQ201 | 质粒DNA 无内毒素 |
细菌培养物（100-200ml） |
|
细胞转染、酶切、连接、转化、PCR、测序 |
| 高效植物基因组 DNA 提取试剂盒 | SB-EQ120 | 植物DNA | 普通植物组织（50-100mg新鲜或20mg干燥） |
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PCR、qPCR、分子标记、文库构建 |
| 细胞/组织 DNA 提取试剂盒（离心柱式） | SB-D401 | 基因组DNA | 组织培养细胞、动物组织、鼠尾 |
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PCR、酶切、连接等分子生物学实验 |
| 小量全血基因组 DNA 提取试剂盒(离心柱型) | SB-NG404 | 基因组DNA | 新鲜、冷冻或抗凝剂处理的血液 |
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PCR、Southern-blot、酶切反应 |
| CTAB 植物基因组 DNA 快速提取试剂盒 | SB-NG411 | 植物DNA | 新鲜或干燥植物组织 （富含多糖、多酚、酶抑制物的难提取植物） |
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PCR、酶切、杂交实验 |
| 细菌基因组 DNA 快速提取试剂盒 | SB-NG408 | 细菌DNA | 细菌菌液（革兰氏阳性/阴性菌） |
|
PCR、Southern-blot、酶切反应 |
产品测试效果
质粒DNA提取效果
测试说明：使用SB-NG201高纯度质粒小量提取试剂盒提取质粒DNA，此实验使用菌液1.5mL菌液，通过琼脂糖凝胶电泳分析提取效果。
结果分析：
- 无明显的RNA污染和基因组DNA污染
- DNA完整性良好，适合下游酶切、转化等应用
- OD260/OD280比值在1.8-1.9之间，表明蛋白质污染极少
常见问题解答
DNA产量低
- 检查样本用量是否符合推荐量
- 确保裂解充分，必要时延长裂解时间
- 检查漂洗液是否已加入乙醇
- 对于质粒提取，检查菌体培养时间和浓度
DNA纯度不高（OD260/OD280比值异常）
- 确保充分洗涤，去除蛋白质等杂质
- 检查漂洗步骤是否彻底
- 对于植物样本，确保多糖多酚去除完全
- 使用推荐的洗脱缓冲液，确保pH合适
下游酶切反应效率低
- 确保洗脱步骤彻底去除乙醇残留
- 检查DNA溶液中是否含有抑制剂
- 对于敏感应用，使用无内毒素试剂盒
- 考虑使用TE缓冲液洗脱并适当稀释
柱子堵塞
- 避免样本用量过多
- 对于含多糖多酚的植物组织，使用专用试剂盒
- 确保所有操作在室温进行
- 裂解后适当离心去除不溶物
RNA污染
- 确保加入了RNase A并进行充分消化
- 对于RNA含量高的样本，增加RNase A用量或延长消化时间
- 检查RNase A活性，必要时更换
基因组DNA污染（质粒提取）
- 控制菌液培养时间（12-16小时）
- 裂解时轻柔混匀，避免剧烈震荡
- 确保中和步骤充分并立即混匀
- 离心后小心吸取上清，避免吸取沉淀
