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SB-YB1041 | 植物超氧阴离子染色液(NBT,pH7.8) | 100mL | 圣尔生物share-bio | ¥360.00 |
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植物超氧阴离子染色液(NBT,pH7.8) 介绍
产品详情 | 产品简介 植物组织在胁迫环境条件下会产生多种活性氧(ROS),ROS活性非常大且极其不稳定,因此ROS的检测通常因其最终产物而定。超氧阴离子是活性氧的一种,属于一种含氧自由基,能将NBT(氮蓝四唑)还原成不溶于水的蓝色甲瓒化合物,从而定位组织中的超氧阴离子。 植物超氧阴离子染色液(NBT,pH7.8)根据上述基本原理也称为NBT染色法,用于植物活组织中的超氧阴离子染色。一般应用于较嫩的根尖、叶片等的整体染色,染色后有超氧阴离子聚集的部位呈蓝色至深蓝色。 自备试剂 1、新鲜的植物叶片或根、自来水、蒸馏水、95%乙醇 2、超声波、磁力搅拌器、电子天平、滤纸、照相机 使用方法 1、试剂准备:将50 mg NBT加入到100mL 磷酸缓冲液(pH7.8) 中充分溶解,即得NBT染色工作液,4℃避光保存,一月内有效。注:如果较难溶解,可通过超声、磁力搅拌等方法促溶。 2、样本准备:采集经胁迫(例如重金属)的采集植物幼苗或根尖,自来水稍洗净,置于滤纸上吸干多余水分。 3、染色:将植物幼苗或根尖浸入NBT染色工作液中,常温避光浸染2~6 h,至阳性部位出现深蓝色,其余部位为淡蓝色或近无色或呈植物本身的颜色即可。(根据植物幼嫩程度。显色程度调整染色时间) 4、脱色:用镊子将植物幼苗或者叶片小心取出,浸入蒸馏水中来回漂洗3~5次,置于滤纸上吸干多余水分后,浸入95%乙醇中40℃处理3~16 h,目的是脱去植株幼苗或者叶片本身的叶绿素或者淡蓝色背景,处理期间可多次更换新鲜的95%乙醇。 5、观察:用镊子取出植株幼苗或者叶片,浸入蒸馏水中来回漂洗3~5次,置于滤纸上吸干多余水分后,将样本转入适量NBT样本保存液中浸泡30 min后,随后可取出拍照。样本可置于该溶液中常温保存一周。 技术资料 - 注意事项 1、 NBT染色工作液配制好以后需4℃避光保存,一月内使用。存放时间过久,会影响显色。 2、因任何外在因素都可能刺激植物应激产生超氧阴离子,因此植物样本需要新鲜采集,并尽快完成染色。建议做阴性及阳性空白对照组。 3、样本染色完成后尽快拍照保存结果。 4、染色和脱色步骤也可参考如下建议操作:组织放入染液中,抽真空,-0.1MPa保持负压20~30min,再于室温下静置染色60min,弃染色液;加入95%乙醇,于70~80℃水浴锅脱色,每隔10min换一次95%乙醇,待样品绿色全部褪去后可停止脱色。 |
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储存条件及期限 | 常温运输,一年有效。 |
植物超氧阴离子染色液(NBT,pH7.8) 说明书
For research use only. Not intended for human and animal therapeutic or diagnostic use.
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