普鲁士蓝染色液(DAB增强法)
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普鲁士蓝染色液(DAB增强法)

货      号 SB-YB1039
规      格 50mL
品      牌 圣尔生物share-bio
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SB-YB1039 普鲁士蓝染色液(DAB增强法) 50mL 圣尔生物share-bio ¥785.00

普鲁士蓝染色液(DAB增强法) 介绍

产品详情

产品简介

含铁血黄素(Hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素,为金黄色或棕黄色颗粒,因其含铁,且为金黄色,故称为含铁血黄素。当红细胞被巨噬细胞吞噬后,在溶酶体酶的作用下,血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。含铁血黄素染色又称为Perls普鲁士蓝反应(Prussian blue reaction) ,用于显示局部组织内的各种出血性病变,常见于吞噬细胞内,可以很好地区分含铁血黄素与其他色素。 普鲁士蓝染色液(DAB增强法)其染色原理是组织中的三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来,与亚铁氰化钾形成一种不溶解的蓝色的亚铁氰化铁沉淀而显示出组织中的高含量铁元素,当组织中的铁元素含量极少时,该染色不能显示出蓝色定位铁元素,加入DAB后,与亚铁氰化铁沉淀发生氧化还原反应形成棕色化合物,增强了检测的特异性,特别适用于组织铁含量较少的组织。

自备试剂

固定液:10%中性福尔马林、4%多聚甲醛等、系列乙醇、蒸馏水、二甲苯、5%草酸

使用方法

临用前配制Perls Stain和DAB Stain: ①配制Perls Stain:将Perls Stain A和Perls Stain B等量混合即为Perls Stain,不宜提前配制。 ②配制DAB Stain:取1支DAB试剂加入到30ml DAB buffer中,充分溶解待用,为DAB溶液;取1μl DAB氧化剂加入到10ml DAB buffer中,充分混合,为DAB氧化工作液;临用前将DAB溶液与DAB氧化工作液等比例混合,即为DAB Stain。 (一)石蜡切片染色 1、组织固定于10%中性福尔马林固定液,常规脱水包埋。 2、切片厚度4μm,常规二甲苯或浸蜡脱蜡透明液脱蜡至水,蒸馏水水洗1min。 3、切片入Perls Stain(见注意事项2)浸染15~30min。 4、蒸馏水充分冲洗2~5min。 5、滴加DAB Stain染色5~10min,显微镜下控制显色程度,倾去染液用DAB buffer浸洗 1 次,蒸馏水洗 3 次。 6、苏木素染色 1~2min,自来水洗,酸性乙醇分化液分化2~5s,自来水洗5~10min。 7、常规脱水,二甲苯或浸蜡脱蜡透明液透明,中性树胶封固。 8、显微镜镜检,图像采集分析。 (二)冰冻切片染色 1、无需脱蜡,直接迅速用蒸馏水冲洗2~3min。 2、染色、封固步骤同石蜡切片的染色步骤,时间可以相应缩短。 阴性对照(可选): 取连续切片脱蜡至水;入5%草酸孵育2~6h,经Perls Stain,其余步骤同上;结果为阴性。

技术资料

含铁血黄素或三价铁 棕褐色 细胞核 浅蓝色 背景或其他组织 浅棕色或无色

注意事项

1、切片脱蜡应尽量干净,组织固定常采用10%中性福尔马林,经普通福尔马林长期固定后,组织会有损伤;避免使用酸性固定剂,铬酸盐处理也会妨碍铁的保存。 2、整个操作过程中容器要干净,避免用金属铁制品,洗切片和容器时以蒸馏水为宜,因普通水内含铁质;Perls Stain染色时应根据样本情况调整着色时间。 3、所有切片都应使用同一个阳性对照切片,选择适合的对照非常重要,尸检肺组织是一个很好的对照,包含相当数量的铁阳性巨噬细胞(心衰细胞)。 4、DAB溶液配制后应-20℃保存,可短期4℃保存;DAB氧化工作液可短期4℃保存,不宜久置,应经常更换新液。如染色效果不好,可增加DAB氧化工作液中氧化剂的加入量。 5、在 DAB 的显色过程中,每隔约 5min 需要在显微镜下观察显色效果,由普鲁士蓝染出的弱阳性(即浅蓝色)被 DAB 替代形成棕色或者无蓝色的部位变成棕色即可。

储存条件及期限 常温储运,一年有效。
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暂无技术资料

普鲁士蓝染色液(DAB增强法) 说明书

For research use only. Not intended for human and animal therapeutic or diagnostic use.

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