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细胞自噬染色检测试剂盒（MDC法）
| 货 号 | SB-YB1030 | ||
|---|---|---|---|
| 英 文 名 | Cell Autophagy Staining Detection Kit (MDC Method) | ||
| 规 格 | 100T | ||
| 品 牌 | 圣尔生物share-bio | ||
| 一键复制产品信息 | |||
| 产品编号 | 名称 | 包装 | 品牌 | 目录价 | 促销价 | 货期 | 数量 | 购物车 |
| SB-YB1030 | 细胞自噬染色检测试剂盒（MDC法） | 100T | 圣尔生物share-bio | ¥150.00 |
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细胞自噬染色检测试剂盒（MDC法） 介绍
| 产品详情 | 产品简介 自噬（autophagy）是细胞受到刺激后吞噬自身的细胞质或细胞器，最终将吞噬物在溶酶体内降解的过程，自噬体（autophagosome）为双层膜包被的圆形或椭圆形结构，内含细胞质、长寿蛋白质和异种蛋白聚集物、损伤或多余细胞器如线粒体、粗面内质网和微体、病毒和细菌等。自噬是一种进化上保守的降解过程，通过溶酶体途径将长寿命蛋白、细胞器及其他细胞质等组分进行降解，自噬通路的激活对多种细胞功能都是必需的，包括饥饿状态下的存活、细胞内组分清除、发育及免疫等过程。 丹酰尸胺（Dansylcadaverine，MDC ），是一种嗜酸性的荧光色素，通常被用于检测自噬体形成的特异性标记染色剂，其检测激发滤光片波长355~380nmnm，阻断滤光片波长512~530nm。细胞自噬染色检测试剂盒（MDC法） 又称为MDC染色液，适用于培养细胞的荧光自噬染色观察，又可用FACS检测细胞自噬发生的比例，可与EB合用双染。 自备试剂 1、低速离心机、1.5ml离心管、载玻片、盖玻片、96孔板、荧光显微镜、流式细胞仪 2、培养液、蒸馏水、磷酸盐缓冲液 使用方法 （一）玻片法 1、收集细胞，用300～500μl的Wash Buffer清洗细胞1次，800～1000rpm离心5min，弃上清，加入适量的Stain Buffer重悬细胞，计数并调节细胞浓度至106/ml。 2、取90μl细胞悬液至新的1.5ml离心管中，加入10μl的MDC Stain(10×)，轻轻混匀。 3、37℃或室温避光染色15～60min。 4、800～1000rpm离心5min，弃上清，收集细胞，用300～500μl的Wash Buffer清洗细胞2次，800～1000rpm离心5min，弃上清。 5、加入100μl的Wash Buffer重悬细胞，滴加于载玻片上并加盖玻片。 6、荧光显微镜观察计数并拍照，也可用流式细胞仪检测药物干预组MDC阳性细胞百分比。 （二）96孔板法 1、轻轻吸除96孔板中的培养液，各孔加入10μl MDC Stain(10×）和90μl的Stain Buffer，37℃ 5%CO2条件下避光孵育15～60min。 2、各孔加入100μl Wash Buffer清洗2～3次，荧光显微镜或流式细胞仪检测观察。 （三）MDC与EB双染法 1、收集细胞，用300～500μl的Wash Buffer清洗细胞1次，800～1000rpm离心5min，弃上清，加入适量的Stain Buffer重悬细胞，计数并调节细胞浓度至106/ml。 2、取90μl细胞悬液至新的1.5ml离心管中，加入10μl MDC Stain(10×）和0.2uM EB染色液，轻轻混匀，滴加于载玻片上，室温避光染色15～60min，加盖玻片。 荧光显微镜或流式细胞仪检测观察。 技术资料 荧光染色结果：药物干预组细胞呈现了更高的荧光强度和更多的亮绿色MDC标记颗粒； FACS检测结果：药物干预组MDC阳性细胞百分比高于对照组。 注意事项 1、MDC Stain和EB对人体有一定害处，请小心操作。 2、收集细胞前可在培养液中加入不同浓度的药物培养一定时间，诱导细胞自噬。 3、操作过程中应注意减少试剂暴露于强光下的时间。 4、Wash Buffer可用PBS代替。 |
|---|---|
| 储存条件及期限 | 于-20℃保存，12个月有效。冰袋运输。 |
细胞自噬染色检测试剂盒（MDC法） 说明书
For research use only. Not intended for human and animal therapeutic or diagnostic use.
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