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产品编号 | 名称 | 包装 | 品牌 | 目录价 | 促销价 | 货期 | 数量 | 购物车 |
SB-YB1017 | 伊文思蓝染色液(0.5%) | 100mL | 圣尔生物share-bio | ¥120.00 |
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SB-YB1017 | 伊文思蓝染色液(0.5%) | 500mL | 圣尔生物share-bio | ¥460.00 |
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伊文思蓝染色液(0.5%) 介绍
产品详情 | 产品简介 伊文思蓝(Evans Blue)又称偶氮蓝,分子量为960.80,CAS号为314-13-6。伊文思蓝属于一种常用的偶氮染料制剂,因其分子量大小与血浆白蛋白相近,而且在血液中与血浆白蛋白有很高的亲和力,因此在神经科学研究中常被用于示踪观察血脑屏障(BBB)的完整性,也用于细胞染色区分活细胞、死细胞,亦可测定血容量。伊文思蓝作临床药物用于测定血浆和血容量,也可作动脉插管的定位。正常情况下血浆白蛋白无法透过血脑屏障,所以染色后如果神经系统血脑屏障完整,与血浆白蛋白结合的伊文思蓝无法使其着色,相反如果神经系统血脑屏障被破坏,伊文思蓝就可以进入神经系统并使其着色,在荧光波长470nm、540nm处有强峰,680 nm处有弱峰,可以使用化学透析法和比色法进行检测。 伊文思蓝与台盼蓝都是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性和细胞是否存活;活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色,伊文思蓝染色后通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量,其中0.5%为最常用的浓度;活细胞因有外排功能而无法被伊文思蓝染色,因此可以通过此方法在显微镜下区分死细胞与活细胞,但无法区分死亡与坏死。 自备试剂 1、注射器、组织匀浆器 2、PBS、三氯乙酸或丙酮 使用方法 (一)血脑屏障通透性 1、取处理后的实验动物(以小鼠为例),经尾静脉或股静脉按照 2~3ml/kg的比例注射Evans Blue Stain(0.5%)数秒至1分钟内,小鼠眼睛、皮肤出现蓝色,0.5~1h后处死小鼠,取目的脑组织。 2、脑组织置于1.5ml离心管中,加入1ml PBS,迅速用组织匀浆器将脑组织制成匀浆, 1000g离心15min。 3、取上清,加入等量三氯乙酸,4℃孵育18~24h;该步骤亦可采用如下操作: 取上清,按上清:丙酮=3:7比例加入丙酮,室温孵育24h。 4、1000g离心20~30 min或2000g离心15min。 5、取上述溶液1~2ml,用分光光度计测620 nm处吸光值(OD值),同时测定已知不同梯度的标准伊文思蓝的OD值,绘制标准曲线,根据标准曲线计算出待测样品的伊文思蓝含量。 (二)活细胞染色 1、取100μl重悬细胞到常规1.5ml或0.5ml离心管内,入100μl Evans Blue Stain(0.5%)轻轻混匀,染色3min(染色时间可适当延长,但不宜超过10min)。 2、吸取少量经过染色后的细胞,用血细胞计数板计数。通常如果要比较精确地进行定量,每个细胞样品至少数500个细胞,数出蓝色细胞和细胞总数。计算公式如下: 细胞存活率=(细胞总数-蓝色细胞数)/细胞总数×100% (三)种子染色 1、用刀片做横切和沿种胚中央准确纵切,入染色液染色3~5min。 2、蒸馏水中浸泡20~60min,视脱色程度而定。 注意事项: 1、Evans Blue Stain(0.5%)对人体有轻微毒性,请小心防护。 2、细胞染色时,注意凋亡小体偶尔也有拒染现象。 3、血脑屏障通透性实验中,Evans Blue Stain(0.5%)注射量应根据不同动物以及动物的重量调整。 4、最好采用低温冷冻离心机进行离心。 5、试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 技术资料 - 注意事项 - |
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储存条件及期限 | 4℃避光保存12个月,常温运输。 |
伊文思蓝染色液(0.5%) 说明书
For research use only. Not intended for human and animal therapeutic or diagnostic use.
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