溶菌酶Lysozyme(40 kU/mg)

溶菌酶Lysozyme(40 kU/mg)

( 别名:LZM;胞壁质酶(muramidase);N-乙酰胞壁质聚糖水解酶(N-acetylmuramide glycanohydrlase) )
货      号 SB-SG133
英  文 名 Lysozyme
规      格 10g
品      牌 圣尔生物share-bio
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溶菌酶Lysozyme(40 kU/mg) 介绍

产品详情

产品介绍

纯化自蛋清egg white,不含DNaseRNaseProtease,可以用于以质粒抽提、蛋白纯化等为目的的细菌裂解。

试剂准备

推荐酶液浓度 10 mg/mL(4 kU/10μL)

推荐使用量  100 μL处理1 g湿菌(即40 kU处理1 g湿菌)

推荐缓冲液 50 mmol/L Tris-Cl (pH 8.0)10 mmol/L EDTA100 mmol/L NaCl

实验步骤

细菌的裂解,在实验室中通常使用酶溶法结合机械破碎法,下面介绍两种方法的实验步骤。

1 酶溶法:

1.1 收集菌体:100 mL细菌培养液,4°C5000 rpm 离心15 min,弃上清,约每克湿菌加3 mL裂解缓冲液,悬浮沉淀。

1.2 每克菌加100 μL溶菌酶(母液10 mg/mL)及8 μL PMSF(母液50 mM),搅拌20 min

1.3 37°C,玻棒搅拌,溶液变得粘稠时加每克菌20μL DNase I(母液1 mg/mL),室温放置至溶液不再粘稠。

2 超声破碎法:声频为15-20 kHz的超声波在高强度声能输入下可以进行细胞破碎,在处理少量样品时操作简便,液体量损失较少,同时还可对染色体DNA进行超声剪切。

2.1 收集1 L待裂解的菌,40 °C5000rpm离心,15 min;弃上清,约每克湿菌加3 mL TE缓冲液。

2.2 按超声处理仪厂家提供的功能参数进行破菌;10 000×g离心,15 min,分别收集上清液和沉淀。

2.3 分别取少量上清和沉淀,加入等体积的2×凝胶电泳加样缓冲液,进行SDS-PAGE

2.4 注意事项:超声破碎与声频、声能、处理时间、细胞浓度、菌种类型等因素有关,应根据具体情况掌握;超声波破菌前,标本经3-4次冻溶后更容易破碎。

注意事项

1 溶菌酶主要对细菌类有作用,此溶菌酶不能完成对酵母的裂解。

2 超声破碎法不适合用于基因组提取。

储存条件 短期4度,长期-20度
搜索质检报告(COA)
搜索MSDS
暂无技术资料

溶菌酶Lysozyme(40 kU/mg) 说明书

For research use only. Not intended for human and animal therapeutic or diagnostic use.

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