随机突变试剂盒 Random Mutagenesis Kit
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随机突变试剂盒 Random Mutagenesis Kit

货      号 SB-QC0106
英  文 名 Random Mutagenesis Kit
规      格 20rxns
品      牌 圣尔生物share-bio
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SB-QC0106 随机突变试剂盒 Random Mutagenesis Kit 4rxns 圣尔生物share-bio ¥260.00
SB-QC0106 随机突变试剂盒 Random Mutagenesis Kit 20rxns 圣尔生物share-bio ¥1170.00

随机突变试剂盒 Random Mutagenesis Kit 介绍

产品详情

随机突变是阐述蛋白质结构和功能之间的关系、改进蛋白质性能的重要工具。 随机突变试剂盒基于易错 PCR(error-prone PCR)技术,利用 Taq DNA polymerase 不具有 3′→5′ 校对功能的特性,在特定的反应缓冲体系中,向扩增的目的基因中引入随机突变密码子。带有随机突变的扩增产物通过双酶切,连接到表达载体中构建文库,然后转化入表达宿主中,进行蛋白活性筛选。如果经一次突变反应不能获得满意的结果,可采用连续易错 PCR(sequential error-prone PCR)策略,即将一次 PCR 扩增得到的有用突变基因作为下一次 PCR 扩增的模板,连续反复地进行随机诱变,使每一次获得的突变累积而产生更有意义的突变。本试剂盒包含有优化的 2×Random System、 Enhancer 和 Sterile Water 三种组分,使用时只需加入适量的 DNA 模板和合成的两条扩增引物,并用水补足体积,即可进行扩增反应,操作简便快速,大大减少了多次加样可能造成的出错和污染机会。2× Random System 含有优化浓度的 Taq DNA polymerase、dNTPs、反应缓冲液和稳定剂,可最大限度地克服常规易错 PCR 技术中,由于 Taq DNA polymerase 本身的偏爱性造成的以 GC 突变为主的缺点,获得相对均衡的突变谱。碱基突变率可通过适量添加Enhancer、调整模板 DNA 量和改变 PCR 扩增循环数进行控制。

下表列出以 10 ng 质粒 DNA 为模板,PCR 扩增一条 1 kb DNA 片段(20个循环)后测序检测得到的突变率结果。需要注意的是,由于不同 DNA 模板的碱基组成不同、长度不一,以及不同引物的扩增效率存在差异,所以即使在相同的 PCR 反应条件下,两组 PCR 产物所得到的突变率也可能不同。因此我们建议根据实验的具体要求,首先进行多个小体系(20 μl)扩增预实验,分别加入不同体积的 Enhancer(如 0 μl、1μl、5 μl、10 μl 等),摸索出符合目标突变率的反应条件后,再放大扩增体系。其他影响突变率的因素见【注意事项】

储存条件 -20℃ 保存,保质期 12 个月;经常使用,可于 4℃ 保存,保质期 3 个月。
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暂无技术资料

随机突变试剂盒 Random Mutagenesis Kit 说明书

For research use only. Not intended for human and animal therapeutic or diagnostic use.

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