干冰运输_Type IIs型内切酶 BsmBI(同裂酶:Esp3I, BstGZ53I, Esp16I, Esp23I)_干冰运输
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干冰运输_Type IIs型内切酶 BsmBI(同裂酶:Esp3I, BstGZ53I, Esp16I, Esp23I)_干冰运输

货      号 SB-EGR407S
规      格 100rxns
品      牌 圣尔生物share-bio
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SB-EGR407S 干冰运输_Type IIs型内切酶 BsmBI(同裂酶:Esp3I, BstGZ53I, Esp16I, Esp23I)_干冰运输 20rxns 圣尔生物share-bio ¥192.00
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干冰运输_Type IIs型内切酶 BsmBI(同裂酶:Esp3I, BstGZ53I, Esp16I, Esp23I)_干冰运输 介绍

产品详情

内切酶BsmBI

产品介绍

内切酶BsmBI属于Type IIs型限制酶,可识别非回文序列,并在识别序列之外进行切割,常用于Golden Gate组装。经过优化的反应Buffer使BsmBI最大限度发挥功能,同时反应缓冲液包含重组白蛋白,其可增强多种酶的稳定性。

识别序列

CGTCTC(1/5)

酶切位点

5'...C G T C T C (N)₁↓...3'

3'...G C A G A G (N)₅↑...5'

【保护碱基】

Not Determined

同裂酶

Esp3I

反应温度

55°C。在37°C进行酶切反应时,有50%的活性。

随酶Buffer

专用Buffer C,不兼容其它缓冲液

【失活条件】

80°C, 20 min

甲基化敏感性

Dam: no effect.Dcm: no effect.CpG: some blocked.EcoKI: no effect.EcoBI: impaired.

超长时间温育检测

最适反应温度下,将10 U BsmBI1 μg λDNA共同温育3 h,未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解,延时酶切可能出现星号活性。

使用方法

1 DNA快速酶切流程

1.1 在冰上按如下建议的加样顺序配制反应体系:

 

50 μl体系

ddH2O

up to 50 μL

10×Buffer C

5 μL

底物DNA

1 μg

内切酶BsmBI (10 U/μl)

1 μL

注:DNA底物中应不含苯酚、氯仿、乙醇、EDTA、洗涤剂或高浓度盐,否则将会影响酶活性

1.2 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴;

1.3 55°C温育15 min-1 h,一般推荐5 U-10 U/μg质粒DNA10U-20U//μg基因组DNA,温浴 1 h如需过夜酶切反应,请将酶量调整至1 U

1.4 80℃温育20 min即可使酶失活,停止反应(可选);

2 注意事项

2.1 反应体系中加入的酶体积不应超过总体积的10%,避免酶中过多的甘油引起星号活性;

2.2 限制性内切酶存储缓冲液中的添加剂(例如甘油、盐)与底物溶液中的污染物(例如盐、EDTA或乙醇等)相同,反应体积越小,酶切反应抑制效应越强。

3 小体积反应体系

总体积

10 μL

25 μL

DNA

0.1 μg

0.5 μg

内切酶BsmBI (10 U/μl)

1 U

5 U

10×Buffer C

1 μL

2.5 μL

ddH2O

up to 10 μL

up to 25 μL

注:为避免蒸发,10 μl反应体系的孵育时间不应超过1 h

储存条件 -20℃
搜索质检报告(COA)
搜索MSDS
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干冰运输_Type IIs型内切酶 BsmBI(同裂酶:Esp3I, BstGZ53I, Esp16I, Esp23I)_干冰运输 说明书

For research use only. Not intended for human and animal therapeutic or diagnostic use.

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