小鼠肿瘤组织温和酶解试剂盒
| 货 号 | SB-C50011 | ||
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| 英 文 名 | High Activity Tumor Tissue Enzymatic Digestion Kit(Mouse) | ||
| 规 格 | 50T | ||
| 品 牌 | 圣尔生物share-bio | ||
| 一键复制产品信息 | |||
| 产品编号 | 名称 | 包装 | 品牌 | 目录价 | 促销价 | 货期 | 数量 | 购物车 |
| SB-C50011 | 小鼠肿瘤组织温和酶解试剂盒 | 50T | 圣尔生物share-bio | ¥3885.00 |
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小鼠肿瘤组织温和酶解试剂盒 介绍
| 产品详情 | 小鼠肿瘤组织温和酶解试剂盒可以将小鼠移植瘤组织温和、快速、高效地制备成单细胞悬液。这一优化方案能够获得尽可能多、
细胞活率高的单细胞样本，同时保留细胞重要的表面抗原表位。获得的单细胞悬液可继续用于肿瘤细胞或TIL（肿瘤浸润淋巴细胞）
的培养或细胞分选等下游实验应用。
主要原理：通过机械剪切和酶消化细胞外基质（维持组织结构完整性）相结合的方法，将肿瘤组织制备成单细胞悬液。单细胞
悬液制备仪主要发挥机械解离作用，而肿瘤组织温和解离试剂盒则主要是通过酶解消化组织。解离后用细胞滤器过滤样本，以去除
样本中的组织残渣，从而获得单细胞悬液，获得的细胞可立即用于后续实验，如原代细胞培养、细胞分选、单细胞测序等。
【产品成分】
产品组成
SB-C50011-50T
保存条件
每T可处理样本量
酶 A 试剂（冻干粉）
1 瓶
2~8℃
解离10mg-1g肿瘤组织/T
（即2.5mL混合酶液）
酶 B 试剂（冻干粉）
1 瓶
2~8℃
酶 C 试剂（冻干粉）
1 瓶
-25~-15℃
Buffer B 缓冲液
8 mL
2~8℃
BufferC 缓冲液
3 mL
2~8℃
【试剂与仪器要求】
RPMI 1640或DMEM培养基
红细胞裂解液（可选）
70μm 细胞滤器
恒温振荡水浴锅
单细胞悬液制备仪及配套组织处理管
0.22μm 针头过滤器（可选）
【试剂准备】
(1) 配制酶A溶液：分别向每瓶酶A冻干粉中加入2.75 mL RPMI 1640或DMEM溶解混匀，分装后冻存于-25~-15℃，溶解后
的酶A溶液效期稳定6个月，避免反复冻融。
(2) 配制酶B溶液：向酶B冻干粉中加入6.875 mL Buffer B溶解混匀。分装后冻存于-25~-15℃，溶解后的酶B溶液效期稳定6
个月，避免反复冻融。
(3) 配制酶C溶液：将酶C试剂（冻干粉）掌上离心机瞬时离心将干粉离心至管底，用1.375mL Buffer C试剂溶解酶C瓶中的
冻干粉。分装后冻存于-25~-15℃，溶解后的酶C溶液效期稳定6个月，避免反复冻融。
如果在组织解离后进行细胞培养，酶试剂需要进行过滤除菌（如将酶工作混合液用0.22 μm的针头过滤器进行过滤除菌）
【肿瘤组织温和酶解方案】
(1) 向组织处理管中加入2.3 mL RPMI 1640或DMEM、50μL酶A、125μL酶B和25μL酶C，配制成工作酶混合溶液。(2) 从小鼠中取下肿瘤块，并剪成2~4mm大小的小块，用RPMI 1640或DMEM暂存组织块，用电子天平称取目的质量的组
织块。
注意：取材过程中，仔细剔除血管和残留的血块，反复漂洗干净组织
(3) 将肿瘤组织转移至装有混合酶溶液的组织处理管中并拧紧，安装到单细胞悬液制备仪中。
(4) 根据肿瘤组织质地柔软/坚硬，设置不同程序完成消化。
（可选）对于一些质地较硬组织，消化完成后可能仍残留一些较大的组织块，可以考虑将1mL枪头剪掉0.5cm尖部，吹打组织
10~15次，帮助释放更多的单细胞悬液。
(5) 完成消化后，用1mL RPMI1640或DMEM培养基润湿70μm细胞滤器，用润湿后的70μm细胞滤器过滤细胞悬液样本，
50mL离心管收集细胞悬液。
(6) 用10mL RPMI 1640或DMEM冲洗组织处理管，并滤过70μm滤器，收集于步骤（5）中的50mL离心管中。
(7) 将细胞悬液500×g离心5分钟，彻底弃去上清。
（可选）红细胞去除：采用1×红细胞裂解液1~2mL对步骤（7）处理后的细胞进行重悬，然后放置冰上孵育3~5min，接着用
10mL的RPMI 1640培养基或DMEM培养基重悬，将细胞悬液500×g离心5min，彻底弃去上清。
(9) 用RPMI 1640培养基或DMEM培养基或其它缓冲液重悬细胞至所需体积，用于后续实验。
【注意事项】
(1) 如组织解离后进行下游细胞培养，应保证在无菌条件下完成所有操作。
(2) 每处理10mg-1g肿瘤组织大约需要2.5mL混合酶溶液酶解消化处理。
(3) 为了分析肿瘤浸润淋巴细胞（TIL），建议将酶混合物中酶B的含量降低至20％（如添加25μL酶B，减少酶B的含量），有
助于更好保护细胞表面表位，但可能对细胞产量和细胞活率有轻微影响。
(4) 若为人源的小鼠荷瘤需使用人肿瘤试剂盒。
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| 储存条件: | 各组分在2-8℃和-20℃分别保存 |
搜索质检报告(COA)
搜索MSDS
暂无技术资料
