通用型死活酵母细胞检测试剂盒（SYTO 9/PI 双染）

【产品介绍】

通用型死活酵母细胞检测试剂盒（SYTO 9/PI 双染）是专为酵母及真菌类细胞量身打造的双荧光死活细胞精准分型检测试剂盒，可高效、稳定、定量地完成酵母活率判定、细胞毒性评价。试剂盒核心组分为绿色荧光核酸染料 SYTO 9 与红色荧光核酸染料碘化丙啶 (PI)，两种染料凭借差异化的细胞膜穿透能力与核酸结合特性，以细胞膜完整性为金标准，实现活酵母与死酵母的特异性区分。酵母的存活状态直接由细胞膜结构完整性决定，是反映细胞代谢活性、生理功能与损伤程度的关键指标。活酵母细胞膜结构完整，可维持胞内稳态并阻挡外源大分子进入；死细胞或濒死细胞则因药物作用、环境胁迫、代谢衰竭等造成细胞膜破损，丧失屏障功能，胞内物质外泄且外源物质可自由进入。本试剂盒基于这一核心生物学特性设计：

(1) SYTO 9 具备良好细胞膜通透性，可进入所有酵母细胞并与核酸特异性结合，发出稳定明亮的绿色荧光。

(2) PI 为膜非通透性红色荧光染料，分子体积大，无法穿透完整细胞膜，仅能进入膜破损的死细胞，与核酸结合后发出强红色荧光。

当两种染料联合使用时，PI 对核酸的结合亲和力更高，可通过竞争性结合与荧光共振能量转移 (FRET) 效应淬灭死细胞内 SYTO 9 的绿色荧光，最终实现活酵母呈绿色荧光、死酵母呈红色荧光的清晰区分，结果直观易判、定量准确。

相较于传统平板计数法估测法等耗时长、主观性强、定量不准、安全性偏低的检测手段，本试剂盒具备操作快捷、灵敏度高、荧光信号强、背景干扰低、结果客观定量等显著优势，可完美适配流式细胞术、荧光显微镜、荧光微孔板读板仪等多平台检测，广泛应用于抗真菌药物筛选、细胞毒性评估、凋亡检测、环境胁迫应答、发酵工艺监测及酵母细胞生物学基础研究，全面满足科研与工业场景对酵母活力快速精准检测的核心需求。

本试剂盒采用即用型染料溶液配制，无需繁琐配制与脱色洗涤，染色后可直接上机或镜检，全程仅需 15 min 即可完成检测，大幅降低实验操作门槛与时间成本，有效避免培养基成分、杂质颗粒与非特异性染色带来的干扰。依托高灵敏度与高特异性的双荧光染色体系，试剂盒不仅能精准测定酵母活率，还可定量评估药物、胁迫因子、理化处理等对细胞的损伤程度，为抗真菌药物研发、病原真菌机制研究、工业发酵质控、食品微生物安全评价、细胞毒性与凋亡分析提供稳定、可靠、可重复的定量检测手段，以标准化实验方案助力科研人员高效获取准确数据，为生命科学基础研究、药物开发与工业微生物应用提供关键技术支撑与科学依据。

【应用范围】

酿酒酵母、毕赤酵母、假丝酵母等各类真菌的活/死细胞比例快速测定、抗真菌药物筛选与效价评价、细胞毒性与胁迫损伤分析

【产品特点】

1、染色效率高：15 min 即可快速定量区分不同类型酵母中的活菌与死菌；

2、背景极低：染色完成后，无需对菌液进行洗涤处理，检测背景基本无荧光干扰；

3、窄谱强信号：SYTO 9 比进口 Bio*DMAO，光谱范围更窄更集中、多色实验兼容性好、信号稳定性更强；

4、适用范围广：酿酒酵母、毕赤酵母、假丝酵母等各类真菌的活/死细胞比例快速测定，检测结果良好；

5、双重检测功能：定性定量一体化，可通过荧光颜色直接区分活菌死菌，也可通过荧光比例精准测算活菌死菌占比；

6、试剂灵活可调：单组分染料独立分装，配比可灵活微调，支持荧光校准，适配多样环境条件。

结果判读：

1、定性分析（显微镜）：

图1. 经 SYTO 9 与 PI 染色的活/死酵母细胞荧光成像图

(a)马克思克鲁维酵母（K. marxianus）；(b)巴斯德毕赤酵母（S. pastorianus，也常称巴氏酵母）；(c)酿酒酵母（S. cerevisiae，菌株号 DSM70424）；(d)酿酒酵母（S. cerevisiae，菌株号 DSM70449），在酵母测试实验中，SYTO 9 与 PI 联合染色时，活酵母和死酵母信号清晰分离，无背景干扰。

2、定量分析（流式细胞仪）：

图2. 酵母流式分析图

将酵母菌经过高温灭活处理后，与活酵母按照不同比例混合，如：活∶死=10∶0、5∶5、0∶10 三种不同比例混合后，经 SYTO9 与 PI 染色后，通过流式细胞术检测，结果表明：如图 B 右下代表活菌，右上为死菌。表明试剂盒可将活死菌精准区分。