免疫组化技术资料与产品推荐
免疫组化简介
免疫组化（Immunohistochemistry, IHC）是一种利用抗原-抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂显色，从而对组织或细胞内的特定抗原进行定位、定性及相对定量研究的实验技术。
基本原理
免疫组化基于抗原-抗体特异性结合的原理。抗体与目标抗原结合后，通过酶-底物反应产生可见的颜色沉淀，从而在显微镜下可视化目标蛋白的分布和数量。
主要应用
免疫组化技术在生物医学研究和临床诊断中具有广泛应用：
- 确定细胞类型和来源
- 肿瘤诊断和分类
- 检测感染因子
- 研究蛋白质表达和定位
- 药物研发和药效评估
免疫组化实验流程
组织取样后立即用4%多聚甲醛固定液固定6-48小时，然后进行脱水、透明、浸蜡和包埋处理，最后切成3-5μm厚度的切片。
将石蜡切片置于60°C烤箱中烘烤1小时，然后依次放入二甲苯I、二甲苯II中各10分钟，再经过梯度酒精(100%、95%、85%、70%)水化，最后用PBS冲洗。
根据目标抗原特性选择适当的抗原修复方法：热诱导表位修复(HIER)或酶消化法。常用柠檬酸钠抗原修复液(pH6.0)或Tris-EDTA抗原修复液(pH9.0)进行高压或微波修复。
组织取样后立即用OCT包埋剂包埋，在液氮或干冰中快速冷冻，然后使用恒冷箱切片机切成5-10μm厚度的切片，贴附于载玻片上，-20°C或-80°C保存。
冰冻切片从冷冻状态恢复至室温后，用预冷的丙酮、乙醇或4%多聚甲醛固定5-15分钟，然后用PBS冲洗3次，每次5分钟。
大多数冰冻切片不需要抗原修复，但某些抗原可能仍需温和的抗原修复。如需修复，通常采用较温和的条件（如37°C酶消化或短时间微波修复）。
| 产品名称 | 货号 | 产品卖点 | 对应的客户需求 | 优势 | 对客户的价值 |
|---|---|---|---|---|---|
| 冷冻切片包埋剂（OCT包埋剂） | SB-IHC013 | 水溶性混合物，支撑组织，减少皱折碎裂 | 冰冻切片制备，保持组织完整性 | 水溶性，不增加背景染色 | 提高切片质量，简化操作流程 |
| 冰冻切片抗原保护液 | SB-IHC010 | 长期保存冰冻切片，保持抗原活性 | 冰冻切片长期保存和运输 | -20°C可保存2年，保持形态和抗原活性 | 延长样本使用寿命，方便实验安排 |
| 通用型组织细胞固定液（4%多聚甲醛） | SB-C010 | 温和固定，保存抗原性和细微结构 | 组织和细胞固定，长期保存 | pH中性，直接使用，适合光镜研究 | 保持样本完整性，提高实验可重复性 |
| 通用型组织细胞固定液（4%多聚甲醛）（DEPC-Treated） | SB-C009 | DEPC处理水配制，防止RNA降解 | 细胞及分子生物学实验，RNA保护 | 无RNase，保持RNA完整性 | 适用于需要RNA保存的高要求实验 |
| Bouin's 固定液 | BOU-OT-1I | 适用于结缔组织和肌纤维染色，固定均匀，细胞微细结构清晰 | 组织固定 | 穿透速度快，固定均匀，组织收缩轻微 | 改善染色效果，保持组织形态 |
| 环保透明剂 | SB-D012 | 无色无味，挥发速率低，可生物降解 | 替代二甲苯，减少毒性暴露 | 不含芳香族化合物，安全性高 | 保护实验人员健康，环境友好 |
| 柠檬酸钠抗原修复液（50X,pH6.0） | SB-IHC002 | 最常用抗原修复液，去除蛋白交联 | 石蜡切片、冰冻切片抗原修复 | 有效暴露抗原表位，改善染色效果 | 提高抗体结合效率，增强信号 |
| Tris-EDTA抗原修复液（50X,pH9.0） | SB-MY001 | 高效抗原修复，适合困难抗原 | 石蜡切片抗原修复，特别是困难抗原 | 有效去除醛类固定导致的蛋白交联 | 解决难修复抗原问题，提高检测成功率 |
用3%过氧化氢溶液室温孵育10-15分钟，以阻断内源性过氧化物酶活性，减少非特异性背景染色。
| 产品名称 | 货号 | 产品卖点 | 对应的客户需求 | 优势 | 对客户的价值 |
|---|---|---|---|---|---|
| 内源性酶封闭液(H2O2法) | SB-D6066 | 有效阻断内源性过氧化物酶活性 | 减少非特异性背景染色 | 低浓度H2O2配方，减少组织损伤 | 提高信噪比，获得清晰染色结果 |
滴加正常血清(与二抗同源)室温封闭20-30分钟，减少非特异性结合。
| 产品名称 | 货号 | 产品卖点 | 对应的客户需求 | 优势 | 对客户的价值 |
|---|---|---|---|---|---|
| 免疫组化笔（PAP Pen） | SB-IHC008 | 防止试剂流淌和扩散，减少用量 | 局部封闭，节省试剂 | 画圈便捷，玻片不易污染 | 节省昂贵抗体，提高实验效率 |
| 山羊血清（封闭用） | SB-IHC100 | 用于免疫组化和免疫荧光封闭，减少非特异性背景 | 封闭非特异性结合位点 | 天然制品，无添加成分，高质量 | 提高信噪比，减少背景染色 |
吸去封闭液，滴加适量稀释的一抗，4°C过夜或室温孵育1-2小时。PBS冲洗3次，每次5分钟。
| 产品名称 | 货号 | 产品卖点 | 对应的客户需求 | 优势 | 对客户的价值 |
|---|---|---|---|---|---|
| 通用型抗体稀释液 | SB-WB008 | 即用型，适合所有免疫抗体测定 | 一抗和二抗稀释，增强免疫反应 | 含增强剂和稳定剂，不含动物源蛋白 | 提高抗体稳定性，减少非特异性结合 |
| GAPDH Antibody | SB-AB0037 | 高特异性，适用于多种应用，多种物种反应性 | 用于Western Blot、IHC等实验中的内参 | 高亲和力，经过亲和纯化，低交叉反应 | 提供可靠的实验结果，节省优化时间 |
| beta Tubulin Antibody | SB-AB0039 | ||||
| alpha Tubulin Antibody | SB-AB0049 | ||||
| beta Actin Antibody | SB-AB0035 |
滴加HRP或AP标记的二抗，室温孵育30-60分钟。PBS冲洗3次，每次5分钟。
| 产品名称 | 货号 | 产品卖点 | 对应的客户需求 | 优势 | 对客户的价值 |
|---|---|---|---|---|---|
| 鼠/兔通用型DAB免疫染色试剂盒 | SB-UE1601 | 通用型二抗，适合鼠/兔源一抗 | 简化实验流程，提高兼容性 | 即用型试剂，包含二抗和DAB显色系统 | 节省时间，提高实验一致性 |
| 羊抗兔二抗DAB免疫染色试剂盒 | SB-UE1600 | 高特异性羊抗兔二抗 | 兔源一抗检测，高灵敏度 | 即用型试剂，包含二抗和DAB显色系统 | 提高检测灵敏度，减少背景 |
滴加新鲜配制的DAB或其他底物显色液，显微镜下控制显色时间，显色完成后立即用蒸馏水终止反应。
| 产品名称 | 货号 | 产品卖点 | 对应的客户需求 | 优势 | 对客户的价值 |
|---|---|---|---|---|---|
| DAB显色试剂盒100X | SB-D6077 | HRP常用底物，产生棕色沉淀 | 免疫过氧化物酶法显色 | 保存持久，光镜下直接观察 | 提供稳定可靠的显色结果 |
苏木素复染细胞核30秒至2分钟，自来水冲洗返蓝。
| 产品名称 | 货号 | 产品卖点 | 对应的客户需求 | 优势 | 对客户的价值 |
|---|---|---|---|---|---|
| 免疫染色洗涤液 | SB-CW010 | 专用洗涤液，降低背景，增强信噪比 | 免疫染色各步骤间的洗涤 | 含Triton X-100，可通透细胞膜 | 提高染色质量，减少非特异性结合 |
| Mayer苏木素染色液 | SB-YB1024 | 无氧化膜形成，进行性染色，无需分化 | 细胞核清晰染色，特别适用于特殊染色后复染 | 染色清晰，不着染胞质和纤维成分，染色时间短 | 简化染色流程，提高实验效率，适合免疫组化复染 |
| 苏木素染色液(Gilb改良) | SB-CP081 | 半氧化苏木素液，不会产生沉淀，不用分化 | 组织切片或培养细胞染色，特别适用于染色机 | 无沉淀，不使用汞、甲醇等有毒试剂，染色稳定 | 自动化染色兼容性好，安全性高，结果稳定可靠 |
依次经过梯度酒精脱水，二甲苯（可用环保透明剂替代）透明，中性树胶（可用环保封片胶替代）封片。
| 产品名称 | 货号 | 产品卖点 | 对应的客户需求 | 优势 | 对客户的价值 |
|---|---|---|---|---|---|
| 环保封片胶 | SB-D010 | 无苯成分，环保安全 | 染色后封片，长期保存 | 透光率、折光率与传统中性树胶一致 | 保护实验人员健康，镜检效果清晰 |
| 环保透明剂 | SB-D012 | 替代二甲苯，环保安全 | 组织透明和脱蜡 | 无色无味，挥发速率低，可生物降解 | 保护实验人员健康，环境友好 |
水性封片剂（如甘油明胶）直接封片，避免使用需要有机溶剂的封片剂。
常见问题解答
| 问题 | 可能原因 | 解决方案 |
|---|---|---|
| 无特异性染色 | 一抗失效或浓度过低；抗原修复不充分；实验操作失误 | 验证一抗活性；优化一抗浓度；加强抗原修复；检查实验步骤 |
| 背景染色过深 | 一抗浓度过高；封闭不充分；洗涤不彻底；DAB显色时间过长 | 优化一抗浓度；延长封闭时间；加强洗涤；控制显色时间 |
| 非特异性染色 | 抗体交叉反应；内源性酶活性未完全阻断 | 使用特异性更高的抗体；增加过氧化物酶阻断时间 |
| 染色不均匀 | 组织切片干燥；试剂覆盖不均匀；切片厚度不一致 | 保持切片湿润；确保试剂完全覆盖组织；检查切片质量 |
| 组织脱落（特别是冰冻切片） | 玻片未涂防脱片剂；烤片时间不足；操作过于剧烈 | 使用多聚赖氨酸处理玻片；适当延长烤片时间；轻柔操作 |
| 弱染色信号 | 一抗浓度过低；抗原表达量低；显色时间不足 | 增加一抗浓度；延长显色时间；使用信号放大系统 |
| 冰冻切片中细胞结构不清晰 | 冷冻速度过慢形成冰晶；切片温度不合适 | 使用液氮快速冷冻；优化切片机温度 |
