细胞培养技术指南
培养基 | 抗生素 | 冻存技术 | 污染防控
细胞培养基分类与应用
按血清需求分类
| 培养基类型 | 主要成分 | 血清含量 | 应用特点 |
|---|---|---|---|
| 基础培养基 | 氨基酸、维生素、无机盐、葡萄糖 | 0% | 成本低、通用性强，需添加血清 |
| 含血清培养基 | 基础成分 + 血清 | 5-20% | 生长因子丰富，适用性广 |
| 低血清培养基 | 基础成分 + 生长因子 | 1-5% | 减少批次差异，维持特定功能 |
| 无血清培养基 | 化学成分 + 特定因子 | 0% | 成分明确，减少干扰 |
| 无蛋白培养基 | 完全化学合成成分 | 0% | 无动物源风险，易纯化 |
按细胞类型/应用分类
常见培养基类型
| 培养基名称 | 主要特点 | 区别 | 圣尔推荐产品 | 应用场景 |
|---|---|---|---|---|
| DMEM | 高糖型适合快速增殖细胞，含非必需氨基酸 | 比MEM添加了更多营养成分，缓冲体系更强 | SB-C002、SB-C011、SB-C021 | 常规贴壁细胞培养，原代成纤维细胞扩增 |
| RPMI 1640 | 含还原型谷胱甘肽，缓冲能力强 | 比DMEM的维生素和氨基酸组成更复杂 | SB-C003 | 悬浮细胞培养（淋巴细胞、杂交瘤细胞、白血病细胞系培养） |
| MEM | 成分简单，基础配方 | 成分最简单，常需添加非必需氨基酸 | SB-C100、SB-C004、SB-C200、SB-C016、SB-C019 | 已建系的贴壁细胞 |
| DMEM/F12 | DMEM和Ham's F12的1:1混合 | 比单独DMEM或F-12提供更全面的营养成分 | SB-C300 | 原代细胞培养、3D类器官培养、干细胞分化和无血清培养基础 |
| Ham's F-10/F-12 | 含多种微量元素和成分（如次黄嘌呤、胸苷），F-12营养更丰富 | 专为低血清/无血清培养设计，DMEM/F12混合培养基常用 | SB-C400 | 原代细胞培养（如肝细胞）、干细胞无血清适应 |
| IMDM | 含更多氨基酸和维生素，硝酸铁替代硫酸铁，缓冲能力更强 | 比DMEM更适合高密度培养，支持难养细胞 | 杂交瘤细胞、造血干细胞、悬浮细胞高密度培养 |
专用培养基类型
| 培养基类别 | 培养基名称 | 圣尔推荐产品 | 特点 | 应用场景 |
|---|---|---|---|---|
| 干细胞培养基 | 人胎盘间充质干细胞专用培养基 | SB-CR436 | 含特定生长因子组合，优化胎盘MSC扩增 | 胎盘来源MSC的大规模培养和临床级制备 |
| 小鼠神经干细胞完全培养基 | SB-FHMP167 | 含EGF和bFGF，支持神经球形成 | 小鼠脑组织来源神经干细胞的增殖和分化研究 | |
| 小鼠肌腱干细胞专用培养基 | SB-YMMP210 | 优化力学响应成分，促进肌腱分化 | 肌腱组织工程和损伤修复研究 | |
| 间充质干细胞无血清培养基 | SB-GR02 | 化学成分明确，无动物源成分 | MSC的标准化培养和临床应用 | |
| 人脐带间充质干细胞无血清培养基(无酚红) | SB-AC005 | 无酚红配方，避免激素干扰 | UC-MSC的荧光成像研究和分化实验 | |
| 人多能干细胞培养基 | SB-AC012 | 含基本多能性维持因子 | hiPSC/hESC的常规维持培养 | |
| Advance 人多能干细胞培养基 | SB-AC013 | 增强配方，减少自发分化 | 高纯度多能干细胞培养和基因编辑 | |
| 人多能干细胞分化培养基 | SB-AC014 | 阶段特异性配方，支持定向分化 | 心脏细胞、神经细胞等谱系分化 | |
| 体细胞培养基 | 内皮细胞培养基 | SB-AC011 | 含VEGF等血管生成因子 | 血管形成和功能研究 |
| HL-1细胞专用完全培养基 | SB-YMMP215 | 心肌细胞系特需成分 | 心脏电生理研究 | |
| DC2.4细胞专用培养基 | SB-CR024 | 树突状细胞活化因子 | 免疫应答研究 | |
| 小鼠肾小管上皮细胞专用培养基 | SB-YMMP040 | 模拟肾小管微环境成分 | 肾脏生理和疾病模型研究 | |
| 小鼠小肠隐窝上皮细胞专用培养基 | SB-YMMP034 | 含Wnt信号通路激活剂 | 肠道类器官培养和干细胞研究 | |
| 小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞专用培养基 | SB-YMMP031 | 优化表面活性蛋白表达 | 肺损伤修复和纤维化研究 | |
| RWPE-1细胞专用培养基 | SB-Y1080 | 前列腺上皮细胞优化配方 | 前列腺疾病模型 | |
| GES-1细胞专用培养基 | SB-C01563-100 | 胃上皮细胞特需因子 | 胃炎和胃癌机制研究 | |
| 小鼠下丘脑神经元细胞专用培养基 | SB-YMMP185 | 含神经肽调节成分 | 代谢和昼夜节律研究 | |
| 小鼠脊髓神经元细胞专用培养基 | SB-YMMP117 | 优化运动神经元存活 | 脊髓损伤和ALS疾病模型 | |
| 小鼠背根神经元细胞专用培养基 | SB-YMMP214 | 促进感觉神经元轴突生长 | 神经痛觉机制研究 | |
| 小鼠海马神经元细胞专用培养基 | SB-YMMP116 | 增强突触可塑性成分 | 学习和记忆机制研究 | |
| 小鼠肺成纤维细胞专用培养基 | SB-YMMP005 | 含TGF-B调控因子 | 肺纤维化模型 | |
| 小鼠心肌细胞专用培养基 | SB-YMMP007 | 优化钙离子调控和节律 | 心脏疾病和药物筛选 | |
| 小鼠支气管平滑肌细胞专用培养基 | SB-YMMP004 | 含气道收缩调节成分 | 哮喘模型研究 | |
| 小鼠骨骼肌细胞专用培养基 | SB-YMMP084 | 促进肌管形成和成熟 | 肌萎缩症研究 | |
| 肿瘤细胞系培养基 | SW480细胞专用培养基 | SB-C01223-100 | 结直肠癌细胞特需因子 | 结肠癌转移机制研究 |
| HELA-S3细胞专用培养基 | SB-CR019 | 悬浮适应型宫颈癌细胞配方 | 大规模病毒生产和蛋白表达 | |
| K562细胞专用培养基 | SB-CR020 | 慢性髓系白血病细胞优化 | 白血病分化和药物筛选 |
抗生素分类与应用
抗生素分类体系
| 抗生素类别 | 代表抗生素 | 作用机制 | 主要应用 |
|---|---|---|---|
| 污染防控型 | 青霉素、链霉素、两性霉素B | 抑制微生物生长 | 预防培养污染 |
| 基因筛选型 | 嘌呤霉素、潮霉素B、G418 | 杀死非转染细胞 | 稳转株筛选 |
| 支原体清除型 | 普那霉素、泰乐菌素 | 抑制支原体蛋白合成 | 根治支原体污染 |
关键抗生素详解
| 抗生素 | 圣尔推荐产品 | 抗菌谱 | 类别 | 作用机制 | 使用浓度 | 适用场景 |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 嘌呤霉素 | SB-CR021 | / | 基因筛选型 | 模拟tRNA，终止肽链合成 | 1-10 μg/mL | 哺乳动物稳转株筛选，瞬时转染后筛选 |
| 潮霉素B | SB-PL707 | / | 基因筛选型 | 干扰核糖体移位，诱导mRNA误译 | 50-1000 μg/mL | 植物/哺乳细胞转基因筛选，稳定细胞株构建 |
| 双抗(青霉素-链霉素) | SB-CR011 | 革兰氏阳性菌+革兰氏阴性菌 | 污染防控型 | 青霉素破坏细胞壁，链霉素抑制蛋白合成 | 100 U/mL + 100 μg/mL | 常规细胞培养防污染 |
| 三抗(青霉素-链霉素-两性霉素B) | SB-CR018 | 细菌+真菌 | 污染防控型 | 双抗基础上增加抗真菌能力 | 青霉素 100 U/mL + 链霉素 100 μg/mL + 两性霉素 B 2.5 μg/mL | 高污染风险操作 |
细胞冻存技术指南
冻存液分类体系
| 冻存液类型 | 核心成分 | 保护机制 | 适用场景 |
|---|---|---|---|
| 含血清型 | 10% DMSO + 90% FBS | DMSO抗冰晶，血清提供营养 | 常规细胞系 |
| 无血清型 | DMSO + 无血清基质 | 化学成分明确保护、批间稳定、无动物源风险 | 适合标准化实验、临床级细胞保存或对血清敏感的细胞（干细胞、免疫细胞） |
| 无动物成分型 | DMSO + 人血清白蛋白 | 避免动物源风险 | 细胞治疗产品 |
细胞污染防控方案
污染分类与鉴定
| 污染类型 | 主要特征 | |
|---|---|---|
| 生物污染 | 细菌污染 | 培养液浑浊、pH骤降(变黄)；镜下可见微小颗粒状/球状细菌活动 |
| 真菌污染 | 棉絮状漂浮物、pH不变 | |
| 支原体污染 | 无可见变化，细胞渐变异常，生长缓慢、代谢异常，需用检测试剂盒 | |
| 黑胶虫污染 | 培养液清亮但悬浮黑点，布朗运动剧烈；血清浓度越高繁殖越快 | |
| 病毒污染 | 改变细胞生物学行为，难以察觉 | |
| 交叉污染 | 不同细胞系混杂 | |
| 化学污染 | 内毒素 | 激活细胞炎症通路，干扰实验结果 |
| 试剂残留 | 清洗剂、重金属离子等细胞毒性物质 | |
| 物理污染 | 微粒污染 | 灰尘、纤维、玻璃碎屑机械损伤细胞 |
| 环境参数异常 | 温度波动、二氧化碳浓度偏差、湿度不足 | |
污染防治产品推荐
污染防控原则
预防优于治理：严格无菌操作是根本
定期监测：每月进行支原体检测
| 产品名称 | 类型/功能 | 圣尔推荐产品 |
|---|---|---|
| 水浴锅除菌剂 | 清除水浴锅中的细菌和真菌 | SB-QC5026 |
| 培养箱除菌剂 | 清除培养箱中细菌、真菌 | SB-QC5027 |
| 细胞房除菌剂 | 清除细胞房中的细菌、真菌 | SB-QC5028 |
| 水盘抑菌剂 | 清除水盘中的细菌和真菌 | SB-QC5029 |
| 支原体PCR检测试剂盒 | 支原体检测 | 202010 |
| 支原体预防清除试剂盒 | 支原体预防、清除 | 202009、SB-QC5016、SB-QC5018、SB-EV0001 |
| 黑胶虫清除试剂盒 | 黑胶虫清除 | SB-C6001 |
更多细胞污染防控知识可至圣尔生物公众号查看
