GC-1 spg小鼠精原细胞系
| 货 号 | SB-YMMX069 | ||
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| 规 格 | T25 | ||
| 品 牌 | 圣尔生物share-bio | ||
| 产品编号 | 名称 | 包装 | 品牌 | 目录价 | 促销价 | 货期 | 数量 | 购物车 |
| SB-YMMX069 | GC-1 spg小鼠精原细胞系 | T25 | 圣尔生物share-bio | ¥1200.00 |
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| 产品详情 | 细胞介绍 该细胞是B型精原细胞通过转染pSV3-neo(含有SV40大T抗原和新霉素耐药编码序列的质粒)而产生的永生化，细胞表达两种睾丸特异性异蛋白，细胞色素c和乳酸脱氢酶C4。 细胞特性 1）来源：睾丸 2）形态：神经元 3） 含量：>1x106 个/mL 4） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性 5） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装 运输和保存 可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式 （1）干冰运输，收到后立即转入液氮冻存或直接复苏； （2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。 （3）收到细胞后请拍照，3天内如果发现污染，请及时拍照与我们联系。 细胞用途： 仅供科研使用。 细胞接收后的处理 1） 收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。 2） 请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3） 弃去T25瓶中的培养基，添加6ml新的完全培养基。 4） 如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代。 5） 接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 细胞培养步骤 一．培养基及培养冻存条件准备 1） 准备DMEM(GIBCO,货号12800017，添加NaHCO3 1.5g/L)，培养基；北美胎牛血清，10%；双抗，1%； 2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。 3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。 二． 细胞处理： 1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。 对于贴壁细胞，传代可参考以下方法： 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。 3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。 下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。 3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 培养细胞时请注意 (1)传代时细胞的接种密度应控制在 1万-4万 活细胞/平方厘米。 (2)选用高质量的胎牛血清配制培养液。 |
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| 储存条件: | 1) 1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。 2) T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过168%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。 |
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