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G422小鼠神经胶质瘤细胞
货      号 SB-YMMX041
规      格 T25
品      牌 圣尔生物share-bio
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SB-YMMX041 G422小鼠神经胶质瘤细胞 T25 圣尔生物share-bio ¥1200.00
产品详情 细胞介绍 1964年建株;甲基胆蒽植入Km小鼠脑内诱发星形细胞瘤,传至第120代后转为胶质细胞瘤;瘤细胞悬液同系小鼠皮下、肌肉、脑内移植,成功率皆100%。肌肉及脑内移植可形成较规律的移植性瘤株,存活时间脑内型15.9±4.8天;肌肉型20.3±6.6天。 细胞特性 1)来源:星形细胞瘤 2)形态:上皮细胞样,贴壁生长 3)含量:>1x10 6 个/mL 4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性 5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装 细胞接受后的处理: 1)收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。 2)请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3)弃去T25瓶中的培养基,添加6ml本公司附带的完全培养基。 4)如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5)接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 细胞用途:仅供科研使用。                         本公司的细胞培养操作规程,供参考 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备DMEM培养基(DMEM,GIBCO,货号11995-065),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于贴壁细胞,传代可参考以下方法: 1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。 3.轻轻吹打后吸出,移入15ml离心管中,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养液后吹匀。 4.移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,先要消化处理并进行细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的1-3步骤进行,最后的重悬液使用血清。悬浮细胞直接计数后离心,用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X10 6 个细胞冻存。
储存条件: 1) 1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。 2) T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过149%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
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